Indahwatie’s Weblog

Mutagenesis pada “leucine gate” untuk dasar penyelidikan dari kemampuan katalitik di dalam Soluble Metana Monooxygenase.

Soluble Metana Monooxygenase (sMMO) dari methan-oxidizing bakteri adalah suatu multikomponen nonheme oxygenase yang secara alami mengoxidasi gas metana ke metanol dan dapat juga cooxidize suatu cakupan luas keberadaan substrat, mencakup mono- dan hidrokarbon diaromatic. Leucine 110, di sisi lokasi yang aktip di dalam subunit α hidroksilase komponen sMMO, telah diusulkan untuk bertindak sebagai suatu gerbang untuk mengendalikan akses substrat kepada lokasi yang aktif. Kristalografi yang sebelumnya wild-type sMMO telah menandai sedikitnya dua penyesuaian enzim yang mempunyai ” leucine gate” terbuka bagi luas berbeda, dan mutagenesis sepancaran enzim telah menandai suatu peran untuk residu ini di dalam pengawasan daerah substrat dan daerah selektif dengan substrat aromatik. Dengan memperluas sistem lebih lanjut untuk ungkapan sepancaran sMMO yang kita yang dikembangkan sebelumnya, kita telah mampu disiapkan bidang mutasi langsung dan tepat pada posisi 110α subunit sMMO. Semua mutants (dengan gly, Cys, Arg, dan Tyr, yang berturut-turut, pada posisi ini) menunjukkan relaksasi daerah selectif membandingkan kepada jenis yang liar dengan substrat monoaromatik dan biphenyl, mencakup penampilan produksi baru timbul dari hidroksilasi pada posisis 2- dan 3- di atas cincin benzen. Mutants dengan Arg yang lebih besar dan Trp residu pada posisi 110 juga menunjukkan pergeseran dalam daerah selektif selama naphthalen hidroksilasi dari posisi 2- ke posisi 1-. Tidak ada bukti yang mutagenesis dari Leu 110 dapat mengijinkan substrates sangat besar untuk memasuki lokasi yang aktif telah ditemukan, bagaimanapun, mutant ( seperti jenis yang liar) adalah non-aktif ke arah hidrokarbon yang triaromatik anthracene dan phenanthrene.
Jadi, hasil penelitian menunjukkan bahwa “leucine gate” di dalam sMMO lebih penting mengendalikan ketepatan daerah selectif dibandingkan dengan ukuran substrat yang dapat masuk lokasi aktif.

Nama : Indah Wati
NIM : B1J006169
e-mail : miss_pulsa@yahoo.com
Blog : indahwatie.wordpress.com
Referensi :
Elena Borodina, Tim Nichol, Marc G. Dumont, Thomas J. Smith, and J. Colin Murrell
Mutagenesis of the “Leucine Gate” To Explore the Basis of Catalytic Versatility in Soluble Methane Monooxygenase
Appl. Envir. Microbiol. 2007 73: 6460-6467. [Abstract] [Full Text] [PDF]